Immunoelectrophoresis

The Immunoelectrophoresis digunakan untuk mengesan diagnostik makmal antibodi monoklonal dalam darah pesakit. Antibodi monoklonal berasal dari sel yang sama dan diarahkan terhadap antigen yang sama. Atas sebab ini, mereka harus dinilai sebagai patologi dan, jika terbukti, bercakap untuk penyakit seperti penyakit Waldenström.

Apa itu Immunoelectrophoresis?

Ion mempunyai pergerakan yang berbeza. Mobiliti yang berbeza ini menjadi asas prosedur elektropheresis. Kaedah ini memisahkan bahan yang berbeza antara satu sama lain menggunakan medan elektrik dan graviti. Kaedah yang terkenal di lapangan adalah immunoelectrophheresis.

Ini adalah kaedah diagnostik kualitatif yang digunakan untuk mengesan antibodi monoklonal. Antibodi adalah bahan protein aktif secara imunologi dari garis sel tertentu. Antibodi monoklonal semuanya berdasarkan limfosit B yang sama dan oleh itu diarahkan terhadap satu epitop. Setiap tindak balas imun semula jadi terhadap antigen menyerang sesuai dengan tindak balas poliklonal dan oleh itu diarahkan terhadap epitop yang berbeza. Oleh itu, tindak balas imun monoklonal memberikan petunjuk proses badan patologi.

Antibodi monoklonal mengikat molekul yang berbeza dengan kekhususan yang tinggi. Pengikatan ini dapat ditunjukkan melalui imunoelektroforesis. Prosedur tersebut adalah prosedur kualitatif dalam diagnostik makmal dan terdiri daripada dua jenis prosedur, elektroforesis serum dan imunodiffusi.

Fungsi, kesan & matlamat

Immunoelectrophoresis menggabungkan metodologi elektroforesis serum dengan imunodiffusion. Serum pesakit diletakkan pada gel agarose atau filem selulosa asetat. Serum kawalan juga digunakan. Aplikasi diikuti dengan pemisahan elektroforetik sampel. Antisera, IgG, IgA, IgM, asid asetik untuk elektroforesis normal dan kappa dan lambda digunakan di antara garis pemisah.

Ini menimbulkan reaksi dengan antibodi dalam serum pesakit, yang menghasilkan garis pemendakan. Bergantung pada antiserum yang digunakan dan kedudukan dan bentuk garis individu, kesimpulan dapat diambil mengenai imunoglobulin yang terkandung dengan rantai ringan kappa atau lambda. Bagi band lambda, terdapat rantai cahaya bebas yang terdiri daripada antibodi. Makmal memberikan bukti tambahan melalui IgE dan IgD yang jarang berlaku, yang memungkinkan penentuan imunoglobulin yang tepat. Kaedah elektroforesis imunodiffusi berlaku menurut Pierre Grabar dan Curtis Williams dan sesuai dengan kombinasi elektroforesis gel agarosa protein dan penyebaran antibodi.

Pertama elektroforesis gel agarosa berlaku. Selepas itu, antibodi yang terkandung meresap pada pita antigen dan dengan itu membuat lengkungan mendakan. Ini dibezakan dari imunoelektroforesis roket menurut Laurell, yang sesuai dengan elektroforesis protein dalam gel agarosa, yang masing-masing mempunyai antibodi dalam kepekatan tertentu. Terdapat sedikit penyangga asas dalam gel, yang hanya membenarkan antigen bermigrasi dan mendorong kebanyakan antibodi ke titik isoelektrik melalui pendedahan kepada nilai pH yang sedikit asas sehingga mereka berhenti bergerak secara elektroforetik.

Pada permulaan imunoelektroforesis roket terdapat lebihan antigen, sehingga kompleks antigen-antibodi larut terbentuk. Semasa elektroforesis, terdapat juga pengikatan antara antigen dan antibodi lain. Dengan cara ini, imunopresipitat terbentuk pada titik kesetaraan, yang menyerupai angka seperti roket dengan ketinggian yang sebanding dengan kepekatan antigen. Ketinggian endapan diukur untuk menilai ujian.

Anda boleh mendapatkan ubat anda di sini

Risiko, kesan sampingan & bahaya

Pengesanan antibodi monoklonal sangat penting untuk diagnosis pelbagai myeloma dan penyakit Waldenström. Bukti yang diberikan menunjukkan degenerasi sel imun yang ganas. Multiple myeloma sesuai dengan barah di sumsum tulang, yang dicirikan oleh penggandaan malignan sel penghasil antibodi dalam plasma.

Sel plasma ini menghasilkan antibodi dan serpihannya. Sel plasma malignan selalu berasal dari sel prekursor biasa dan oleh itu genetiknya sama. Mereka hanya menghasilkan antibodi monoklonal. Keganasan penyakit ini dapat sesuai dengan tahap prakanker, tetapi juga dapat mencapai tahap yang sangat ganas, yang tanpa rawatan cepat membawa maut. Gejala penyakit berpunca daripada pertumbuhan sel yang ganas atau dari antibodi dan serpihan antibodi. Gejala yang paling biasa termasuk sakit tulang, pembubaran tulang, dan patah spontan.

Tahap kalsium dalam darah sering meningkat. Selain itu, antibodi yang tidak normal sering disimpan dalam tisu dan menyebabkan gangguan fungsi pada organ, yang boleh menyebabkan gejala seperti kegagalan buah pinggang atau aliran darah yang terganggu. Penyakit Waldström juga merupakan penyakit tumor malignan. Lebih tepat lagi, ia adalah penyakit limfoma malignan yang dikira di antara limfoma sel-B bukan Hodgkin yang perlahan dan hampir tidak simptomatik. Dalam kebanyakan kes, pengeluaran IgM monoklonal yang tidak normal kerana aktiviti sel limfoma malignan dapat dikesan dalam penyakit ini.

Penyakit Waldenström sangat serupa dengan pelbagai myeloma pada sifatnya, tetapi biasanya menunjukkan jalan yang lebih baik. Sebilangan besar pesakit dengan penyakit Waldenström sebahagian besarnya tidak simptomatik pada saat mereka didiagnosis. Pesakit lain menunjukkan gejala pada peringkat awal, seperti keletihan bukan spesifik atau neuropati periferal, yang disebabkan oleh pemendapan IgM monoklonal dalam sarung myelin. Walaupun sedikit IgM boleh mencetuskan polyneuropathy. Tidak ada polinuropati yang berlaku pada pesakit lain, walaupun pada tahap tinggi. Selain itu, gejala tidak spesifik seperti demam, penurunan berat badan yang tidak diingini atau berpeluh malam boleh berlaku. Kesakitan tulang juga merupakan ciri.

Oleh kerana terlalu banyak pengeluaran IgM, darah menjadi hiperviskosa, sehingga gejala yang disebutkan dapat dikaitkan dengan gejala sindrom hiperviskositi. Dalam kebanyakan kes, kecenderungan pendarahan ini terjadi pada mimisan, sakit kepala, kelainan umum atau penglihatan kabur dan keluhan akustik. Untuk mengesan penyakit ganas jenis ini, immunoelectrophheresis telah lama menjadi prosedur diagnostik standard.