Diagnostik pra persenyawaan

The Diagnostik pra persenyawaan menawarkan kemungkinan pengujian genetik sel telur wanita sebagai sebahagian daripada persenyawaan in vitro (IVF). Pemeriksaan dilakukan pada kromosom badan kutub ke-1 dan ke-2, yang timbul semasa meiosis ke-1 dan ke-2 setelah pengenalan sperma lelaki ke dalam sel telur. Kelebihan kaedah ini adalah bahawa bukan merupakan diagnosis pra-implantasi (PGD), kerana pemeriksaan dilakukan sebelum inti perempuan dan lelaki bergabung, sehingga diagnosis prefertilisasi diizinkan di beberapa negara di mana PGD dilarang.

Apa itu diagnostik prefertilisasi?

Diagnostik pra-persenyawaan memungkinkan untuk mengesan penyimpangan kromosom pada gen haploid sel telur wanita dalam konteks persenyawaan in vitro (IVF). Yang terpenting, penyimpangan berangka dari kromosom tertentu (aneuploidi) dan kelainan gen tertentu yang menyebabkan penyakit keturunan dapat dikesan. Apabila sperma lelaki dimasukkan ke dalam sitoplasma sel telur semasa IVF, meiosis pertama dan kedua (meiosis I dan II) telur dipicu.

Pembahagian ini menghasilkan dua sel "berlebihan", badan kutub, yang mempunyai set kromosom yang sama dengan sel telur itu sendiri. Badan kutub, yang biasanya akan dipecah oleh tubuh, dikeluarkan oleh biopsi badan kutub untuk pemeriksaan kromosom. Oleh kerana diagnosis prefertilisasi selalu dilakukan pada badan polar, prosedur ini juga disebut diagnosis badan polar (PKD). Kelebihan kaedah pemeriksaan adalah bahawa ia juga dapat dilakukan di beberapa negara di mana diagnosis pra-implantasi (PGD) dilarang, kerana pemeriksaan dilakukan pada genom sel telur ketika inti sel sel sperma dan sel telur belum menyatu.

Kelemahannya ialah hanya penyimpangan kromosom genom ibu yang dapat diperiksa. Kromosom sperma yang dimasukkan ke dalam sitoplasma telur tidak dapat dikesan dengan kaedah ini. Penyakit berkaitan Y tidak dapat dikenali kerana set kromosom haploid sel telur tidak dapat mengandungi kromosom Y.

Fungsi, kesan & matlamat

Sebagai sebahagian dari diagnosis pra-persenyawaan dalam bentuk pemeriksaan tubuh kutub genetik, anomali berangka (aneuploidi) dapat dikesan pada kromosom tertentu dari genom ibu serta translokasi di mana segmen kromosom dipisahkan dan disatukan kembali di tempat yang salah. Sebagai tambahan, mutasi gen yang berkaitan dengan X dapat didiagnosis yang diwarisi dari ibu dan berdasarkan mutasi gen tunggal (penyakit monogenik). Ini mengandaikan bahawa penyakit keturunan yang berpotensi mesti diketahui agar dapat secara khusus memeriksa gen tertentu pada kromosom X.

Dalam kes pewarisan resesif, ada kemungkinan kromosom X badan kutub - dan juga kromosom X sel telur yang disenyawakan, mengandungi alel yang sihat dari gen yang sesuai. Prosedur itu sendiri merangkumi biopsi badan kutub di mana dua badan polar haploid dikeluarkan dari sel telur dan kromosom kemudiannya menjalani ujian FISH (hibridisasi pendarfluor in situ). Biopsi badan kutub merupakan cabaran besar bagi makmal yang melakukan prosedur, kerana pengenalpastian dan pengasingan badan kutub memerlukan sejumlah pengalaman. Untuk prosedur ujian FISH, probe DNA yang disebut tersedia untuk kromosom terpilih, yang menghubungkan ke kromosom haploid yang sesuai kerana mereka mempunyai urutan asid amino pelengkap.

Probe DNA ditandai dengan warna pendarfluor yang berbeza sehingga kromosom kemudian dapat dikenal pasti dengan bantuan perisian khas dan dikira dalam proses automatik. Sebilangan besar penyimpangan kromosom, seperti aneuploidi dan pergeseran kromosom dalam kromosom, boleh membawa maut. Ini bermaksud bahawa IVF tidak membentuk zigot, atau bahawa embrio ditolak setelah dipindahkan ke rahim, atau bahawa keguguran awal atau lambat berlaku. Oleh kerana kekerapan penyimpangan kromosom pada sel telur wanita meningkat seiring bertambahnya usia, tujuan penting diagnostik pra-persenyawaan adalah pemilihan positif telur yang disenyawakan. Hanya telur yang disenyawakan dengan genom yang utuh - jika dapat dikenali - ditransplantasikan kembali ke rahim.

Pemilihan positif dikatakan dapat meningkatkan kadar kehamilan selepas IVF dan mengurangkan kadar telur yang disenyawakan yang ditolak dan jumlah keguguran. Tujuan lain adalah untuk mengecualikan penyakit keturunan berdasarkan penyimpangan kromosom atau kecacatan genetik tertentu pada telur yang disenyawakan sejak awal dengan pemilihan positif telur yang disenyawakan. Penyakit keturunan khas yang dapat dikecualikan oleh ujian adalah fibrosis kistik, atrofi otot tulang belakang dan anemia sel sabit.

Risiko, kesan sampingan & bahaya

Diagnostik persenyawaan dilakukan di luar badan dan oleh itu tidak melibatkan risiko fizikal tambahan bagi wanita yang berkenaan. Hanya terdapat risiko kecederaan fizikal dan jangkitan yang rendah yang berkaitan dengan penyingkiran telur. Berbeza dengan PGD, yang juga termasuk pemeriksaan kromosom menggunakan ujian FISH, diagnosis pra-persenyawaan hanya dapat memeriksa bahan kromosom dan genetik dari ibu.

Ini bermaksud bahawa ujian IKAN negatif di mana tidak ada penyimpangan kromosom atau genetik yang didiagnosis dapat menimbulkan harapan yang terlalu positif pada ibu bapa mengenai perjalanan kehamilan dan kelahiran berikutnya. Penyimpangan kromosom genom ayah dan sebarang anomali kromosom Y yang boleh menyebabkan penyakit keturunan yang berkaitan dengan seks tidak direkodkan. Dalam hal ini, diagnostik pra-persenyawaan bahkan lebih tidak lengkap daripada PGD, di mana seluruh genom embrio dalam tahap blastula dapat diperiksa.

Namun, walaupun dengan PGD negatif, tidak dapat dikesampingkan bahawa terdapat kecacatan genetik pada genom embrio yang dapat menyebabkan perkembangan yang tidak diingini dan kemungkinan terjadinya kerusakan setelah lahir. Ujian FISH hanya boleh merujuk kepada kromosom dan gen terpilih.